审计穿行测试是注册会计师追踪交易在财务报告信息系统中处理过程，以了解被审计单位业务流程及其相关控制的一种审计程序。严格来说，审计穿行测试就是把重要的交易流程从前到后的全部大概地“看”一遍。
以销售与收款循环为例，就是通过检查、观察、询问等审计程序，从接受客户订单、赊销审批、销售单形成、发货、收款、账务处理等一系列的内容全部“走”一遍，然后确定内部控制的设置是否良好、内部控制是否正在执行等情况，从而对相关的内部控制进行评价，并且在评价的基础上确定是否执行控制测试。
实务中，注册会计师都是按照“一条线”进行穿行测试的。
